Le « Forum Shaking Technology » est un ensemble de sociétés partenaires impliquées dans différents domaines de l’industrie des laboratoires et des biotechnologies.
C’est une ressource utile pour les utilisateurs de bioréacteurs agités, fournissant un soutien, des informations ainsi qu’une base de données de publications.
Toutes les questions concernant les cultures agitées que vous envoyez au forum sont automatiquement transmises par « Dr Shaker » au spécialiste concerné.
La base de données de publications présente les articles scientifiques portant sur les cultures agitées (des plaques de microtitration au bioréacteur agité de 1 000 L). Continuellement mise à jour, la base de données contient aujourd’hui plus de 1000 publications.
Nous recommandons d’utiliser des plaques à 96 puits avec une barrière stérile telle qu’un ruban d’étanchéité perméable à l’air ou un couvercle Duetz. Le volume de remplissage doit être inférieur à 500 µL pour permettre un mélange et un échange gazeux appropriés. Fixez les plaques en toute sécurité et agitez-les avec un diamètre orbital de 50 mm à la vitesse de 300 tr/min. Les diamètres orbitaux plus petits peuvent être compensés en augmentant la vitesse d’agitation.
Pour plus d’informations, consultez la publication suivante sur les phénomènes de transfert de masse gaz-liquide dans les plaques de microtitration: https://doi.org/10.1002/bit.10456
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L’évaporation peut être minimisée en utilisant un incubateur agité avec un contrôle actif de l’humidité ajusté à 80–85 % d’humidité et en choisissant la barrière stérile appropriée.
Il existe des « couvercles sandwich » spécialement conçus pour différents types de plaques de microtitration. Ils permettent des taux de rafraîchissement de 1-2 volumes de culture par minute, assurant un apport suffisant d’oxygène, mais limitant l’évaporation à environ 2 % du volume de culture par jour. Cela évite l’humidification de l’air dans l’incubateur pour la plupart des applications. Kuhner et EnzyScreen offrent tous les types de couvercles et les systèmes de serrage appropriés.
Pour plus d’informations, consultez la publication suivante sur l’évaluation de la perméation à l’oxygène et à l’eau au moyen de rubans d’étanchéité pour microplaques : https://doi.org/10.1021/bp025774t
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E. coli est un micro-organisme très actif sur le plan respiratoire, de sorte que le volume de remplissage ne doit pas dépasser 5 à 10 % du volume total de la fiole (c.-à-d. 10 à 25 ml dans une fiole de 250 ml). Les conditions de culture recommandées pour la culture aérobie d’E. coli dans une fiole à col large de 250 ml avec bouchon de coton sont les suivantes :
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Bien que rarement noté dans la littérature, le diamètre d’agitation exerce une influence majeure sur la culture. Généralement, l’augmentation du diamètre d’agitation augmente l’intensité de mélange et le taux de transfert d’oxygène (OTR). Dans le cas des bouillons de fermentation visqueux, un grand diamètre d’agitation (50 ou 70 mm) permet également de maintenir le mélange de culture « en phase ».
Pour plus d’informations, consultez la publication suivante sur le transfert de masse gaz-liquide dans les bioréacteurs agités : https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1369703X00001078?via%3Dihub
Pour plus d’informations sur le taux de transfert d’oxygène, consultez nos AppNotes :
Capacité maximale de transfert d’oxygène
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